目的 探讨丝胶对PI3K/Akt/mTOR信号通路的调控及其对三阴性乳腺癌（TNBC) MDA-MB-468细胞自噬的诱导作用,并阐明作用靶点。 方法 将MDA-MB-468细胞随机分为对照组（不含药物）、实验组（8 mg·mL ^-1丝胶）、Akt激活剂组（8 mg·mL ^-1丝胶+10 μmol·L ^-1 SC79）,分别给予相应药物作用24 h后,采用RT-qPCR法检测各组细胞PI3K、Akt、mTOR、自噬效应蛋白（Beclin1）、自噬相关蛋白5（ATG5）、微管相关轻链蛋白3（LC3）、螯合体1（P62）mRNA表达水平;Western blotting法检测各组细胞PI3K、Akt、p-Akt、mTOR、p-mTOR、Beclin1、ATG5、LC3、P62蛋白表达水平;免疫荧光染色法检测各组细胞LC3、P62蛋白的定位及荧光强度。 结果 与对照组相比,实验组MDA-MB-468细胞PI3K、Akt、mTOR、P62 mRNA及PI3K、Akt、p-Akt、mTOR、p-mTOR、P62蛋白水平均显著降低（P<0.05）,Beclin1、ATG5、LC3 mRNA水平及Beclin1、ATG5、LC3Ⅱ/LC3Ⅰ蛋白水平均显著升高（P<0.05）;与实验组相比,Akt激活剂组MDA-MB-468细胞PI3K、Akt、mTOR、P62 mRNA及PI3K、Akt、p-Akt、mTOR、p-mTOR、P62蛋白水平均显著升高（P<0.05）,Beclin1、ATG5、LC3 mRNA水平及Beclin1、ATG5、LC3Ⅱ/LC3Ⅰ蛋白水平均显著降低（P<0.05）。 结论 丝胶对MDA-MB-468细胞自噬的诱导作用可通过以Akt为靶点调控PI3K/Akt/mTOR信号通路的转导来实现。

目的 观察丝胶对链脲佐菌素（STZ）致损伤大鼠胰岛素瘤细胞（INS-1细胞）PI3K/Akt信号通路和糖酵解的调控作用。 方法 实验以体外培养的INS-1细胞为研究对象随机分为五组,正常对照组、模型组、丝胶组、Akt1抑制剂组、Akt1激动剂组。运用蛋白印迹和实时荧光定量PCR法检测各分组细胞的磷脂酰肌醇-3-激酶（PI3K）,蛋白激酶B（Akt）,磷酸果糖激酶-1（PFK1）,6-磷酸果糖-2,6-二磷酸酶（PFKFB2）的蛋白及mRNA的表达情况。 结果 与正常对照组相比,模型组PI3K,p-Akt,PFK1,PFKFB2的蛋白表达显著下降（P<0.05）;丝胶组与模型组相比PI3K,p-Akt,PFK1,PFKFB2的蛋白表达显著增高（P<0.05）;Akt1抑制剂组与丝胶组相比,p-Akt,PFK1,PFKFB2的蛋白表达显著降低（P<0.05）;Akt1激动剂组与丝胶组相比,p-Akt,PFK1,PFKFB2的蛋白呈现上升的趋势。各组INS-1细胞中PI3K,Akt,PFK1,PFKFB2 mRNA的变化趋势与蛋白一致。 结论 丝胶对STZ致损伤INS-1细胞发挥保护作用的机制可能是,靶向Akt1影响PI3K/Akt信号通路增强糖酵解。

目的 探讨丝胶是否通过靶向Akt1调控磷酸肌醇-3-激酶（PI3K）/蛋白激酶B（protein kinase B,Akt）信号通路促进链脲佐菌素（STZ）致损伤大鼠胰岛素瘤细胞（INS-1细胞）增殖。 方法 INS-1细胞随机分为4组：对照组（不予任何处理）、模型组（给予10 mmol/L STZ处理细胞）、丝胶组（给予10 mmol/L STZ+600 μg/mL丝胶处理细胞）、抑制剂组（给予10 mmol/L STZ+600 μg/mL丝胶+0.3 mmol/L的Akt1抑制剂A-674563处理细胞）。药物作用时间均为24 h。CCK-8法检测各组INS-1细胞存活率。免疫蛋白印迹法（western blot）检测PI3K/Akt信号通路相关蛋白PI3K、p-Akt和增殖相关蛋白增殖细胞核抗原（PCNA）、细胞核增殖相关抗原Ki67（Ki67）的表达情况。 结果 与对照组相比,模型组INS-1细胞存活率下降（P<0.05）,PI3K、p-Akt1、PCNA和Ki67的蛋白表达显著下降（P<0.05);与模型组相比,丝胶组INS-1细胞存活率上升（P<0.05）,PI3K、p-Akt1、PCNA和Ki67的蛋白表达显著增多（P<0.05）;与丝胶组相比,抑制剂组INS-1细胞存活率下降（P<0.05）,p-Akt1、PCNA和Ki67的蛋白表达显著下降（P<0.05）。 结论 丝胶具有促进STZ致损伤INS-1细胞增殖的作用,其作用机制与丝胶通过靶向Akt1调控PI3K/Akt信号通路有关。