目的 探究利福平耐药实时荧光定量核酸扩增技术（Xpert MTB/RIF）快速检测结核分枝杆菌及耐药性分析。方法 选取2018年1月~2019年12月我院收集的168例疑似结核病患者标本,分别给予涂片抗酸染色法、液体培养法、Xpert MTB/RIF试验、传统比例法药敏试验检测,分析Xpert MTB/RIF快速检测结核分枝杆菌及利福平耐药性的敏感度、特异度。结果 液体培养法阳性率（26.79%）高于涂片抗酸染色法、Xpert MTB/RIF试验（14.29%、22.62%）（χ²=8.139,P=0.017）;Xpert MTB/RIF试验与液体培养法符合率89.99%,与涂片抗酸染色法符合率91.67%;Xpert MTB/RIF试验检测利福平耐药敏感度85.71%（6/7）,特异度89.47%（34/38）。结论 Xpert MTB/RIF试验结核分枝杆菌阳性检出率显著高于涂片抗酸染色法,与液体培养法具有较好一致性,对利福平耐药性敏感度、特异度良好。