目的 运用网络药理学和分子对接技术,探讨秋水仙碱在调控铁死亡治疗神经损伤中的作用。方法 使用PubChem和Swiss Target Prediction数据库获得秋水仙碱靶点,GeneCards、OMIM和DisGeNET数据库获得神经损伤靶点,FerrDb数据库获得铁死亡靶点,利用Venny 2.1.0工具获得三者交集靶点。基于STRING数据库构建PPI网络,并用Metascape进行GO和KEGG通路富集分析。最后,使用Autodock Vina对秋水仙碱与前十靶点进行分子对接分析。结果 秋水仙碱靶点401个,神经损伤靶点3 367个,铁死亡靶点1 543个,交集靶点57个。PPI网络显示TP53、IL6、EGFR等为主要靶点,KEGG分析表明秋水仙碱通过Wnt信号通路调控铁死亡治疗神经损伤。分子对接结果显示秋水仙碱与多个靶点结合良好。结论 秋水仙碱可能通过Wnt信号通路调控相关基因,治疗神经损伤。

目的 探讨膜联蛋白A7（ANXA7）过表达对人胃癌MGC-803细胞增殖和凋亡的影响。方法 将人胃癌MGC-803细胞分为ANXA7过表达组、阴性对照组,脂质体转染法将pcDNA3.1-ANXA7重组质粒以及空质粒分别转染ANXA7过表达组和阴性对照组。采用Western blot鉴定ANXA7过表达;转染48h采用CCK-8实验检测各组细胞增殖能力;流式细胞术检测各组细胞凋亡率;Western blot检测各组细胞增殖和凋亡相关蛋白PCNA、CyclinD1、Casepase-3、Cleaved casepase-3的表达。结果 与阴性对照组相比,ANXA7过表达组MGC-803细胞增殖能力显著增强、PCNA与CyclinD1的表达均升高(P<0.05);细胞凋亡率降低、Cleaved casepase-3的表达降低(P<0.05);Casepase-3的表达变化无统计学意义(P>0.05)。结论 ANXA7过表达可促进人胃癌MGC-803细胞的增殖并抑制其凋亡。

目的 探索骨髓间充质干细胞外泌体修复脊髓后索损伤大鼠感觉的功能。方法 抽提大鼠骨髓间充质干细胞外泌体。将大鼠分为假手术组、PBS对照组、外泌体组,构建后索损伤模型。外泌体组经尾静脉注射外泌体,PBS对照组注射等量PBS。胶带移除实验和体感诱发电位评估感觉传导功能。免疫荧光染色观察脊髓后索形态。Western Blot检测STAT3蛋白和GAP43蛋白。结果 免疫荧光染色显示所提取骨髓间充质干细胞可表达CD29和CD90。Western Blot显示抽提外泌体高表达HSP70与Alix。与PBS对照组相比,外泌体组NF-200染色阳性神经元累积光密度大,体感诱发电位波形与胶带移除实验潜伏期改善,STAT3与GAP43蛋白表达升高(P<0.05)。结论 骨髓间充质干细胞外泌体可通过STAT3/GAP43通路修复后索损伤大鼠感觉功能。

目的 探索骨髓间充质干细胞（bone marrow mesenchymal stem cell,BMSC）外泌体对初级感觉神经元STAT3/GAP43通路和轴突生长的调控作用。方法 提取Wistar大鼠BMSC,光学显微镜观察细胞形态并进行鉴定;使用超速离心法提取BMSC外泌体并鉴定。使用提取的BMSC外泌体处理原代培养初级感觉神经元（大鼠背根神经节神经元）,细胞免疫荧光染色检测初级感觉神经元轴突的生长情况,Western Blotting法检测初级感觉神经元STAT3和GAP43蛋白的表达情况。结果 细胞免疫荧光染色显示所提取的细胞同时表达CD29和CD90,证实为BMSC;Western Blotting显示所提取的外泌体表达HSP70和Alix。相比于对照组,BMSC外泌体组神经元轴突的长度明显增加,STAT3与GAP43蛋白的表达明显升高(P<0.05)。结论 BMSC外泌体可通过调控STAT3/GAP43通路促进初级感觉神经元轴突生长。