目的 建立可视化环介导等温扩增（LAMP）检测方法,应用于表皮葡萄球菌的快速检测。方法 针对表皮葡萄球菌的SesB基因,选择特异性引物,建立环介导等温扩增体系。对反应的可视化方法、体系中的MgSO₄浓度、甜菜碱浓度、反应温度、反应时间进行优化。将优化好的LAMP反应和PCR反应的灵敏度和特异性进行比较。结果 环介导等温扩增反应体系中最适MgSO₄终浓度为4mM;最适甜菜碱浓度为0.4M;最适反应温度和时间为63 ℃,反应60 min;最适宜的可视化方法为钙黄绿素显色法且可视化结果与琼脂糖凝胶电泳结果基本一致;LAMP和PCR反应均具有较好的特异性,LAMP反应的灵敏度为10 copies/μL,PCR反应的灵敏度为100 copies/μL。结论 LAMP钙黄绿素可视化检测表皮葡萄球菌感染优于普通PCR,操作简便且不需要昂贵检测设备,有望应用于基层和偏远贫困地区早期诊断。

目的 调查承德市周边农村蜱传立克次氏体目细菌的流行现状,分析承德地区人兽共患无形体和立克次体的种类及其遗传特征,为蜱传立克次氏体病的防控提供理论依据。方法 本研究从承德市三沟镇和六沟镇采集蜱并提取总DNA,使用巢氏PCR技术扩增16S rRNA基因进行立克次氏体目细菌的鉴定。扩增无形体（Anaplasma）的热休克蛋白（groEL）基因和立克次体（Rickettsia）的外膜蛋白A（ompA）基因,测序后对序列进行同源性与系统发生分析,对蜱传人兽共患无形体和立克次体病原体进行鉴定。结果 在三沟镇和六沟镇共采集到336只蜱,经鉴定均为长角血蜱。蜱感染无形体的阳性率为25.3%（85/336）,立克次体的阳性率为17.3%（58/336）,蜱感染无形体的阳性率显著高于立克次体（P=0.01）。无形体包括山羊无形体（Anaplasma capra）和羊无形体（Anaplasma ovis）,阳性率分别为8.3%（28/336）和17.0%（57/336）; 立克次中西伯利亚立克次体（Rickettsia sibirica）的阳性率为3.6%（12/58）,饶氏立克次体（Rickettsia raoultii）的阳性率为6.3%（21/58）,Candidatus Rickettsia jingxinensis的阳性率7.4%（25/58）。结论 承德市长角血蜱携带有2种人兽共患无形体与3种立克次氏体,表明承德周边农村地区流行立克次氏体目细菌具有较高的遗传多样性,需加强承德地区蜱与蜱传病原体的监测与防控。